口蹄疫病毒以傳播速度快,發(fā)病率高被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)和糧農(nóng)組織(FAO)列為A類烈性傳染病,我國將其列為一類傳染病。目前,發(fā)達國家控制FMD主要采取撲殺,無害化處理等措施,從源頭控制FMD的流行;亞洲、非洲、歐洲一些國家主要以疫苗免疫來防控口蹄疫的發(fā)生與流行。疫苗免疫后抗體效價的評價,這就需要根據(jù)免疫計劃,定時采血評價免疫效果。
正向間接血凝試驗是將抗原吸附(致敏)于與免疫無關的顆粒性載體(紅細胞)表面,然后與相應的抗體作用,在適宜電解質(zhì)存在的條件下發(fā)生肉眼可見的特異性凝集現(xiàn)象。在基層動物防疫工作中,由于各方面條件不足,為了準確進行免疫效果評估和疫情預測,正向間接血凝試驗成為小型養(yǎng)殖戶和基層試驗方法。
口蹄疫O型抗體快速檢測卡采用夾心法設計。將膠體金顆粒標記的純化口蹄疫病毒O型抗原1噴吐于結合墊上,干燥備用。而將純化的口蹄疫病毒O型抗原2和口蹄疫病毒O型抗體IgG調(diào)整至工作濃度,分別噴涂于NC膜的檢測帶(T)和質(zhì)控帶(C)上。稀釋好的樣品血清從樣品墊流向金標成品膜。樣品中所含的抗體會在檢測帶的位置上與標記的抗原結合發(fā)生相應的反應。質(zhì)控帶上發(fā)生的反應用以確定試紙條上液體正確的流向。
液相阻斷ELISA是將預先滴定好的病毒抗原與被檢血清首先在液相中反應,然后將抗原抗體復合物轉移到包被了口蹄疫特異性抗體的ELISA板中,沒有*被血清抗體阻斷的病毒抗原ELISA板中抗體捕獲,再通過酶結合物與底物顯色。按照試驗孔呈現(xiàn)顏色。通過酶標儀讀值,來判定抗體效價。
正向間接血凝 (HIA)、液相阻斷ELISA、金標試紙條是現(xiàn)階段常用的口蹄疫O型抗體檢測方法,但在實際應用中過程中仍存在某些問題,主要是不同檢測方法的檢測結果存在差異,造成結果解釋困難。為更好分析實際檢測結果,科學理解和選擇檢測方法,本試驗選用了3種不同的檢測方法進行對比試驗,對口蹄疫O型抗體不同檢測方法之間的一致性和差異性結果進行了詳細全面分析。